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巯基乙醇于蛋白印迹之应用

夫蛋白印迹之术，为析蛋白之要法。其中2 - 巯基乙醇（2 - Mercaptoethanol）于Western Blot 之用，颇关紧要。

2 - 巯基乙醇具强还原性，可破蛋白分子内及分子间之双硫键。蛋白结构赖双硫键维系，破之则蛋白亚基解离，呈单链状。于样品处理时，添适量2 - 巯基乙醇，与蛋白样品共温育。其速入蛋白内部，断双硫键，令蛋白结构变构。

此变构之举，于Western Blot 有诸般益处。其一，蛋白亚基解离后，依分子量于凝胶电泳中更好分离。各亚基泳动速率异，得清晰条带，便于析蛋白分子量及亚基构成。其二，抗原表位得更充分暴露。双硫键破后，蛋白内部隐藏表位现于外，抗体与之结合更易，增检测灵敏度与特异性。

然用2 - 巯基乙醇亦有需留意处。其具挥发性与刺激性，操时须于通风橱内，且防护周全，免伤身体。用量亦当精准，过少则双硫键破不全，影响分离与检测；过多或致蛋白过度变性，失其免疫活性。

总之，2 - 巯基乙醇于Western Blot 作用关键，善用之可令蛋白印迹结果精准、可靠，为蛋白研究之得力助手。